送你一个10色15抗体单管方案筛查淋巴瘤

平时碰到稀有样本，例如脑脊液、穿刺组织等，大家可能都心惊胆颤的，就怕标本用完了，结果还无法确定。所以此时，多色方案就必须上了。

但是，即使目前的10色流式细胞仪，要做到用10个抗体很完善地筛查淋巴瘤，覆盖到B、T、NK，还是挺难的，所以现在就有不少学者开始尝试利用一些抗原之间的互斥表达，将两个抗体搭配到一起，以期最大效率地利用每一个荧光通道。这不，加拿大那边的学者最喜欢做这事，上次他们研究出一个10色14抗体的单管方案，同时筛查细胞减少患者的髓系、淋系细胞（RajabA,PorwitA.Screeningbonemarrowsamplesforabnormallymphoidpopulationsandmyelodysplasia-relatedfeatureswithone10-color14-antibodyscreeningtube.CytometryBClinCytom.;88:‐.），这次，A.Rajab等人再次给我们带来一个10色15抗体的单管方案，称之为LPD-ST，可有效筛查各系淋巴瘤。

话不多说，直接上方案：

CD4/kappaFITCCD8/lambdaPECD3/CD14ECDCD38PC5.5CD20/CD56PC7CD10APCCD19APC-ACD5APC-ACD57/CD23PBCD45KO

测试结果如何，直接看图：

图1、LPD-ST管分析良性/反应性淋巴结细针穿刺样本中的B细胞。

A、排除碎片。B、先淋巴/单核区域。C、圈单核细胞区域，用于下一步排除。D、选CD19＋细胞，用于下一步逻辑门组合。E、利用选择CD19＋CD20＋细胞。F：选择CD38高表达和CD38中等表达的浆细胞、嗜碱粒，用于排除。G、组成逻辑门((CD19+orCD20+)and(notPC))and(notCD3+)and(notMonocytes)，命名为B-cell，分析其中的lambda/kappa表达。H、分析CD19＋或CD20＋中CD5＋细胞比例，即正常的B1细胞。I、B1细胞中的轻链表达。J、B-cell门下CD5＋、CD23＋为慢性淋巴细胞白血病常见出现区域。K、看B-cell门下CD10＋比例。L：看B-cell的CD20/CD38分化模式。

图2、LPD-ST管分析上述样本的T和NK细胞。

A、选CD3＋（避开SSC大的单核细胞）。B、选CD5＋。C、设置T-cells逻辑门：CD3+and(notCD19+)，看CD4、CD8表达比例。D、看T-cells下的CD5/CD3表达情况，很多T细胞淋巴瘤存在CD5降低。E、设置T/NK-cells逻辑门：((“Notdebris”andLymph+Mono)and(notCD19+))and(notMonocytes)，然后看其中的CD56/CD3表达情况，选择CD56＋CD3－的NK细胞，再接着看F图的CD3/CD57表达，H图看CD57＋细胞的CD4、CD8表达情况。最后的I图看CD10＋T细胞是否存在。

图3、A图为CLL患者外周血，B图为MCL患者外周血，C图为滤泡淋巴瘤患者的骨髓。

图4、D图为异常T细胞，该类T细胞CD10＋，最后确诊为血管免疫母T细胞。E图可见异常浆细胞。

作者进行了60例标本的测试，他认为，对于下面几类情形，基本上这一管就能定出结论

正常/反应性CLL/SLL/MBLMCL生发中心NHL

而对于以下情形，则还需要加做：

HCL其它B细胞淋巴瘤T细胞淋巴瘤其它：5例诊断为B-ALL、T-ALL、MM和MGUS等

所以，总体看起来，这个方案还是不错的，有10色仪器的FLOWER可以参考一下，或者8色和6色的仪器也可以借鉴一下思路，减少管数。

参考源：

白癜风
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